胚胎冻存:

       胚胎冻存是最早的和最安全的保存实验动物品系的方法。胚胎的来源,可以通过超排卵后合笼获得,也可以通过体外受精(IVF)的方式获得。
影响胚胎冷冻保存成功的三个重要方面包括:
①冻存胚胎的数量;
②复苏后存活胚胎的数量;
③胚胎移植后存活的成年动物数量。

 

冻存建议:建议每个品系冻存约300枚2细胞期胚胎,每管20~30枚胚胎,放入液氮中保存。胚胎冻存期间可根据客户实验需要提供胚胎复苏服务。

胚胎冻存技术的流程:

服务内容:由客户提供转基因或基因敲除雄鼠,至远生物负责将该小鼠与超排的雌鼠交配或者IVF,取2细胞期胚胎,并采用玻璃化冷冻保存方法进行胚胎冻存,保存在液氮中。

技术指标:客户提供6-10只12周至6月龄雄鼠(转基因阳性鼠或基因敲除杂合子/纯合子雄鼠),并提供基因修饰鼠基因型鉴定的引物及条件;中心负责小鼠基因型复检(PCR方法),将超排后的4-6周龄雌鼠与基因修饰雄鼠交配或者IVF,取2细胞期胚胎,每个品系冻存300枚2细胞期胚胎。

 

精子冻存:

       精子冻存在保种服务中广泛应用,其优势是技术成熟,成本低,容易操作。通过无菌手术分离可育雄鼠的附睾,在特定的溶液进行精子的游离,采集边缘活力最好的精子,并加入专用的冷冻保护液,放置于麦管/冻存管冷冻保存在液氮中。

冻存建议:建议每个品系提供至少3只12周至6月龄的可育成年雄鼠,冻存10-20麦管/冻存管的精液。

优势:

①保存暂不需要用的品系

②减少遗传漂变、防止自发突变导致的遗传性状改变

③保证珍贵小鼠品系不会因疾病、天灾人祸的改变而造成太大的损失

 

胚胎和精子复苏服务:

 

服务内容:客户需要时,我们将冻存的胚胎或者精子进行复苏,将得到的胚胎移植到SPF级假孕的小鼠受体中,得到SPF级的小鼠后代。外来的胚胎(精子)需提供冷冻方法或者复苏方法。

技术指标:中心保存的胚胎(精子)复苏后,提供2只以上SPF级转基因阳性鼠或基因敲除杂合子小鼠,雌雄不限;客户提供的冷冻胚胎复苏移植后,所有出生的仔鼠均提供给客户。可提供客户相关的鉴定报告。

服务周期:9-12周内完成

 

动物模型基因鉴定

       至远生物提供快速准确的基因型鉴定服务,包括PCR,Realtime PCR,HRM以及PCR结合测序等。

实验步骤:

①小鼠组织取材
②小鼠DNA提取(酒精沉淀法、膜吸附法、磁珠法等)
③PCR
④电泳或测序
⑤胶图拍照等图像采集
⑥数据分析和报告整理

我们提供:

1. 实验结束后剩余样品DNA和鉴定引物

2. 实验报告

3. 原始条带的荧光或灰度图